Dankon, ke vi vizitis Nature.com. La retumila versio, kiun vi uzas, havas limigitan CSS -subtenon. Por la plej bona sperto, ni rekomendas ke vi uzu ĝisdatigitan retumilon (aŭ malebligas kongruan reĝimon en Interreta Esplorilo). Intertempe, por certigi daŭran subtenon, ni redonos la retejon sen stiloj kaj JavaScript.
Plej multaj metabolaj studoj ĉe musoj estas efektivigitaj ĉe ĉambra temperaturo, kvankam en ĉi tiuj kondiĉoj, male al homoj, musoj elspezas multan energion konservante internan temperaturon. Ĉi tie, ni priskribas normalan pezon kaj dietan induktitan obezecon (DIO) en C57BL/6J musoj Fed Chow Chow aŭ 45% alta grasa dieto respektive. Musoj estis metitaj dum 33 tagoj ĉe 22, 25, 27.5 kaj 30 ° C en nerekta kalorimetria sistemo. Ni montras, ke energia elspezo pliiĝas lineare de 30 ° C ĝis 22 ° C kaj estas ĉirkaŭ 30% pli alta je 22 ° C en ambaŭ musaj modeloj. En normala pezo musoj, manĝaĵa konsumado kontraŭbatalis EE. Al la inversa, Dio -musoj ne malpliigis manĝaĵon kiam EE malpliiĝis. Tiel, ĉe la fino de la studo, musoj je 30 ° C havis pli altan korpan pezon, grasan mason kaj plasman glicerolon kaj trigliceridojn ol musoj je 22 ° C. La malekvilibro en Dio-musoj eble estas pro pliigita plezur-bazita dieto.
La muso estas la plej ofte uzata besta modelo por la studo de homa fiziologio kaj fiziopatologio, kaj ofte estas la defaŭlta besto uzata en la fruaj stadioj de malkovro kaj disvolviĝo de drogoj. Tamen, musoj diferencas de homoj laŭ pluraj gravaj fiziologiaj manieroj, kaj dum alometria grimpado povas esti uzata en iu mezuro por traduki al homoj, la grandegaj diferencoj inter musoj kaj homoj kuŝas en termoregulado kaj energia homeostazo. Ĉi tio pruvas fundamentan malkonsekvencon. La meza korpa maso de plenkreskaj musoj estas almenaŭ mil fojojn malpli ol tiu de plenkreskuloj (50 g kontraŭ 50 kg), kaj la surfaco al masa rilatumo diferencas ĉirkaŭ 400 fojojn pro la ne-linia geometria transformo priskribita de MEE . Ekvacio 2. Rezulte, musoj perdas signife pli da varmego rilate al sia volumo, do ili estas pli sentemaj al temperaturo, pli inklinaj al hipotermio, kaj havas averaĝan bazan metabolan indicon dekoble pli alte ol tiu de homoj. Ĉe norma ĉambra temperaturo (~ 22 ° C), musoj devas pliigi sian tutan energian elspezon (EE) ĉirkaŭ 30% por konservi kernan korpan temperaturon. Ĉe pli malaltaj temperaturoj, EE pliigas eĉ pli ĉirkaŭ 50% kaj 100% je 15 kaj 7 ° C kompare kun EE je 22 ° C. Tiel, normaj loĝkondiĉoj induktas malvarman streĉan respondon, kiu povus kompromiti la transdoneblecon de musaj rezultoj al homoj, ĉar homoj vivantaj en modernaj socioj pasigas la plej grandan parton de sia tempo en termoneŭtralaj kondiĉoj (ĉar niaj malsuperaj areaj rilatumoj al volumo faras nin malpli sentemaj al temperaturo, ĉar ni kreas termoneŭtran zonon (TNZ) ĉirkaŭ ni. Pli mallarĝa bando ĉirkaŭ 2-4 ° C7,8 fakte, ĉi tiu grava aspekto ricevis konsiderindan atenton en la lastaj jaroj4, 7,8,9,10,11,12 kaj oni sugestis, ke iuj "specioj de specioj" povas mildigi Pliigante ŝelan temperaturon 9. Tamen, ne ekzistas konsento pri la temperaturintervalo, kiu konsistigas termoneŭtralecon en musoj. Tiel, ĉu la pli malalta kritika temperaturo en la termoneŭtrala gamo en unu-genuaj musoj estas pli proksima al 25 ° C aŭ pli proksime al 30 ° C4, 7, 8, 10, 12 restas diskutebla. EE kaj aliaj metabolaj parametroj estis limigitaj al horoj ĝis tagoj, do la mezuro en kiu plilongigita ekspozicio al malsamaj temperaturoj povas influi metabolajn parametrojn kiel korpa pezo estas neklara. Konsumo, substrata uzado, glukoza toleremo, kaj plasmaj lipidoj kaj glukozaj koncentriĝoj kaj apetito-reguligantaj hormonoj. Krome, necesas pliaj esploroj por konstati ĝis kia grado dieto povas influi ĉi tiujn parametrojn (Dio-musoj sur alta grasa dieto povas esti pli orientitaj al plezur-bazita (hedona) dieto). Por doni pliajn informojn pri ĉi tiu temo, ni ekzamenis la efikon de reprodukta temperaturo sur la menciitaj metabolaj parametroj en normalaj pezaj plenkreskaj viraj musoj kaj dieto-induktitaj obesaj (DIO) viraj musoj sur 45% alta grasa dieto. Musoj estis konservitaj ĉe 22, 25, 27.5, aŭ 30 ° C dum almenaŭ tri semajnoj. Temperaturoj sub 22 ° C ne estis studitaj ĉar norma besta loĝejo estas malofte sub ĉambra temperaturo. Ni trovis, ke normalaj pezaj kaj unu-cirklaj DIO-musoj respondis simile al ŝanĝoj en ĉirkaŭfosa temperaturo koncerne EE kaj sendepende de enfermaĵo (kun aŭ sen ŝirmejo/nestado). Tamen, dum normalaj pezaj musoj alĝustigis sian manĝaĵon laŭ EE, la manĝaĵa konsumado de DIO -musoj estis plejparte sendependa de EE, rezultigante musojn gajnante pli da pezo. Laŭ datumoj de korpa pezo, plasmaj koncentriĝoj de lipidoj kaj cetonaj korpoj montris, ke Dio -musoj je 30 ° C havis pli pozitivan energian ekvilibron ol musoj je 22 ° C. La subaj kialoj de diferencoj en ekvilibra konsumado de energio kaj EE inter normala pezo kaj Dio-musoj postulas plian studadon, sed eble rilatas al fiziopatologiaj ŝanĝoj en Dio-musoj kaj la efiko de plezur-bazita dieto rezulte de obesa dieto.
EE pliiĝis lineare de 30 ĝis 22 ° C kaj estis ĉirkaŭ 30% pli alta je 22 ° C kompare kun 30 ° C (Fig. 1A, B). La spira interŝanĝa indico (RER) estis sendependa de temperaturo (Fig. 1C, D). Manĝaĵa konsumado estis konforma al EE -dinamiko kaj pliiĝis kun malpliiĝanta temperaturo (ankaŭ ~ 30% pli alta je 22 ° C kompare kun 30 ° C (Fig. 1E, F). Akva konsumado. Volumo kaj aktiveco ne dependis de temperaturo (Fig. 1G).
Viraj musoj (C57BL/6J, 20 semajnoj, individuaj loĝejoj, n = 7) estis loĝigitaj en metabolaj kaĝoj je 22 ° C. Dum unu semajno antaŭ la komenco de la studo. Du tagojn post la kolekto de fonaj datumoj, la temperaturo estis levita en 2 ° C pliigoj je 06:00 horoj ĉiutage (komenco de la luma fazo). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± norma eraro de la mezumo, kaj la malhela fazo (18: 00-06: 00 h) estas reprezentita per griza skatolo. Energia elspezo (kcal/h), B totala energia elspezo ĉe diversaj temperaturoj (kcal/24 h), C spira interŝanĝa indico (VCO2/VO2: 0.7-11.0), d meznombro en lumo kaj malhela (VCO2/VO2) fazo (Nulo -valoro estas difinita kiel 0,7). E Akumula manĝaĵa konsumado (G), F 24h totala manĝaĵa konsumado, G 24h totala akvo -konsumado (ml), H 24h totala akvo -konsumado, I akumula aktiveco -nivelo (M) kaj J totala aktiveco -nivelo (M/24H). ). La musoj estis konservitaj ĉe la indikita temperaturo dum 48 horoj. Datumoj montritaj por 24, 26, 28 kaj 30 ° C rilatas al la lastaj 24 horoj de ĉiu ciklo. La musoj restis nutritaj dum la studo. Statistika signifo estis testita per ripetaj mezuradoj de unudirekta ANOVA sekvita de la multobla kompara testo de Tukey. Asteriskoj indikas signifon por komenca valoro de 22 ° C, ombrado indikas signifon inter aliaj grupoj kiel indikite. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0,05, ** p <0,01, ** p <0,001, **** p <0,0001. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0,05 ， ** p <0,01 ， ** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *P <0,05 ， ** p <0,01 ， ** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *P <0,05, ** p <0,01, ** p <0,001, **** p <0,0001. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001.Averaĝaj valoroj estis kalkulitaj por la tuta eksperimenta periodo (0-192 horoj). n = 7.
Kiel en la kazo de normalaj pezaj musoj, EE pliiĝis lineare kun malpliiĝanta temperaturo, kaj en ĉi tiu kazo, EE ankaŭ estis ĉirkaŭ 30% pli alta je 22 ° C kompare kun 30 ° C (Fig. 2A, B). RER ne ŝanĝiĝis ĉe malsamaj temperaturoj (Fig. 2C, D). Kontraste al normalaj pezaj musoj, manĝaĵa konsumado ne konformis al EE kiel funkcio de ĉambra temperaturo. Manĝaĵa konsumado, konsumado de akvo kaj agnivelo estis sendependaj de temperaturo (Figoj 2e - J).
Viraj (C57BL/6J, 20 semajnoj) DIO -musoj estis individue loĝigitaj en metabolaj kaĝoj je 22 ° C dum unu semajno antaŭ la komenco de la studo. Musoj povas uzi 45% HFD ad libitum. Post aklimatigo dum du tagoj, bazaj datumoj estis kolektitaj. Poste la temperaturo estis levita en pliigoj de 2 ° C ĉiun alian tagon je 06:00 (komenco de la luma fazo). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± norma eraro de la mezumo, kaj la malhela fazo (18: 00-06: 00 h) estas reprezentita per griza skatolo. Energia elspezo (kcal/h), B totala energia elspezo ĉe diversaj temperaturoj (kcal/24 h), C spira interŝanĝa indico (VCO2/VO2: 0.7-11.0), d meznombro en lumo kaj malhela (VCO2/VO2) fazo (Nulo -valoro estas difinita kiel 0,7). E Akumula manĝaĵa konsumado (G), F 24h totala manĝaĵa konsumado, G 24h totala akvo -konsumado (ml), H 24h totala akvo -konsumado, I akumula aktiveco -nivelo (M) kaj J totala aktiveco -nivelo (M/24H). ). La musoj estis konservitaj ĉe la indikita temperaturo dum 48 horoj. Datumoj montritaj por 24, 26, 28 kaj 30 ° C rilatas al la lastaj 24 horoj de ĉiu ciklo. Musoj estis konservitaj ĉe 45% HFD ĝis la fino de la studo. Statistika signifo estis testita per ripetaj mezuradoj de unudirekta ANOVA sekvita de la multobla kompara testo de Tukey. Asteriskoj indikas signifon por komenca valoro de 22 ° C, ombrado indikas signifon inter aliaj grupoj kiel indikite. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001. *Р <0,05, *** р <0,001, **** р <0,0001. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0,05 ， *** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *P <0,05 ， *** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *Р <0,05, *** р <0,001, **** р <0,0001. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001.Averaĝaj valoroj estis kalkulitaj por la tuta eksperimenta periodo (0-192 horoj). n = 7.
En alia serio de eksperimentoj, ni ekzamenis la efikon de ĉirkaŭa temperaturo sur la samaj parametroj, sed ĉi -foje inter grupoj de musoj, kiuj estis konstante konservitaj je certa temperaturo. Musoj estis dividitaj en kvar grupojn por minimumigi statistikajn ŝanĝojn laŭ la meznombro kaj norma devio de korpa pezo, graso kaj normala korpa pezo (Fig. 3a - C). Post 7 tagoj da aklimatigo, 4,5 tagoj da EE estis registritaj. EE estas signife trafita de la ĉirkaŭa temperaturo ambaŭ dum taglumaj horoj kaj nokte (Fig. 3D), kaj pliiĝas lineare dum la temperaturo malpliiĝas de 27,5 ° C ĝis 22 ° C (Fig. 3E). Kompare kun aliaj grupoj, la RER de la grupo 25 ° C estis iom reduktita, kaj ne estis diferencoj inter la ceteraj grupoj (Fig. 3F, G). Manĝaĵa konsumado paralela al EE -ŝablono A pliigita ĉirkaŭ 30% je 22 ° C kompare kun 30 ° C (Fig. 3H, I). Akvo -konsumo kaj agniveloj ne diferencis signife inter grupoj (Fig. 3J, K). Eksponiĝo al malsamaj temperaturoj dum ĝis 33 tagoj ne kondukis al diferencoj en korpa pezo, malgrasa maso kaj grasa maso inter la grupoj (Fig. 3N-S), sed rezultigis malpliiĝon de malgrasa korpa maso de proksimume 15% kompare kun Mem-raportitaj partituroj (Fig. 3N-S). 3b, r, c)) kaj la grasa maso pliiĝis pli ol 2 fojojn (de ~ 1 g ĝis 2-3 g, Fig. 3C, T, C). Bedaŭrinde, la 30 ° C -kabineto havas kalibrajn erarojn kaj ne povas provizi precizajn EE kaj RER -datumojn.
- Korpa pezo (A), malgrasa maso (B) kaj grasa maso (C) post 8 tagoj (unu tagon antaŭ transdono al la Sable -sistemo). D Energia Konsumo (KCAL/H). e meza energikonsumo (0-108 horoj) ĉe diversaj temperaturoj (kcal/24 horoj). F Respiratory Exchange Ratio (RER) (VCO2/VO2). g meznombro RER (VCO2/VO2). h Tuta konsumado de manĝaĵoj (G). Mi celas manĝaĵon (g/24 horojn). J Tuta Akvo -Konsumo (ML). K Meza akvo -konsumo (ml/24 h). l Akumula agnivelo (M). m Meza aktiveco -nivelo (m/24 h). n Korpa pezo en la 18a tago, o ŝanĝo en korpa pezo (de -8a ĝis 18a tago), p malgrasa maso en la 18a tago, Q -ŝanĝo en malgrasa maso (de -8a ĝis 18a tago), R grasa maso en la tago 18 , kaj ŝanĝo en grasa maso (de -8 ĝis 18 tagoj). La statistika signifo de ripetaj mezuroj estis testita de Oneway-Anova sekvita de la multobla kompara testo de Tukey. *P <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001, **** p <0,0001. *P <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0,05 ， ** p <0,01 ， *** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *P <0,05 ， ** p <0,01 ， *** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *P <0,05, ** p <0,01, *** p <0,001, **** p <0,0001. *P <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001, **** p <0.0001.Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro + norma eraro de la mezumo, la malhela fazo (18: 00-06: 00 h) estas reprezentita per grizaj skatoloj. La punktoj sur la histogramoj reprezentas individuajn musojn. Averaĝaj valoroj estis kalkulitaj por la tuta eksperimenta periodo (0-108 horoj). n = 7.
Musoj estis parigitaj en korpa pezo, malgrasa maso kaj grasa maso ĉe bazlinio (Figoj 4a -C) kaj konservitaj ĉe 22, 25, 27.5, kaj 30 ° C kiel en studoj kun normala pezo -musoj. . Kiam oni komparas grupojn de musoj, la rilato inter EE kaj temperaturo montris similan linean rilaton kun temperaturo kun la tempo en la samaj musoj. Tiel, musoj konservitaj je 22 ° C konsumis ĉirkaŭ 30% pli da energio ol musoj konservitaj je 30 ° C (Fig. 4D, E). Kiam oni studis efikojn ĉe bestoj, temperaturo ne ĉiam influis RER (Fig. 4F, G). Manĝaĵa konsumado, konsumado de akvo kaj aktiveco ne estis signife trafitaj de temperaturo (Figoj 4H -M). Post 33 tagoj da bredado, musoj je 30 ° C havis signife pli altan korpan pezon ol musoj je 22 ° C (Fig. 4N). Kompare kun iliaj respektivaj bazpunktoj, musoj levitaj je 30 ° C havis signife pli altajn korpajn pezojn ol musoj kreskigitaj je 22 ° C (meznombro ± norma eraro de la mezumo: Fig. 4O). La relative pli alta pezo -kresko ŝuldiĝis al pliigo de grasa maso (Fig. 4P, Q) anstataŭ pliigo de malgrasa maso (Fig. 4R, S). Konsentite kun la pli malalta EE -valoro je 30 ° C, la esprimo de pluraj BAT -genoj, kiuj pliigas BAT -funkcion/agadon, reduktiĝis je 30 ° C kompare al 22 ° C: ADRA1A, ADRB3, kaj PRDM16. Aliaj ŝlosilaj genoj, kiuj ankaŭ pliigas BAT -funkcion/agadon, ne estis tuŝitaj: sema3a (neŭrita kreskregulado), TFAM (mitokondria biogenezo), ADRB1, ADRA2A, PCK1 (gluconeogenesis) kaj CPT1A. Surprize, UCP1 kaj VEGF-A, asociitaj kun pliigita termogena agado, ne malpliiĝis en la grupo 30 ° C. Fakte, UCP1-niveloj en tri musoj estis pli altaj ol en la grupo 22 ° C, kaj VEGF-A kaj ADRB2 estis signife levitaj. Kompare kun la grupo 22 ° C, musoj konservitaj je 25 ° C kaj 27,5 ° C montris neniun ŝanĝon (Suplementa Figuro 1).
- Korpa pezo (A), malgrasa maso (B) kaj grasa maso (C) post 9 tagoj (unu tagon antaŭ transdono al la Sable -sistemo). D Energia Konsumo (EE, KCAL/H). e meza energikonsumo (0–96 horoj) ĉe diversaj temperaturoj (kcal/24 horoj). F Respiratory Exchange Ratio (RER, VCO2/VO2). g meznombro RER (VCO2/VO2). h Tuta konsumado de manĝaĵoj (G). Mi celas manĝaĵon (g/24 horojn). J Tuta Akvo -Konsumo (ML). K Meza akvo -konsumo (ml/24 h). l Akumula agnivelo (M). m Meza aktiveco -nivelo (m/24 h). n Korpa pezo je la tago 23 (g), o Ŝanĝo en korpa pezo, p maldika maso, Q -ŝanĝo en malgrasa maso (G) je la tago 23 kompare kun la tago 9, ŝanĝo en grasa maso (G) je 23 -tago, graso Maso (G) kompare kun la tago 8, tago 23 kompare kun -8a tago. La statistika signifo de ripetaj mezuroj estis testita de Oneway-Anova sekvita de la multobla kompara testo de Tukey. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001. *Р <0,05, *** р <0,001, **** р <0,0001. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001. *P <0,05 ， *** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *P <0,05 ， *** p <0,001 ， **** p <0,0001。 *Р <0,05, *** р <0,001, **** р <0,0001. *P <0.05, *** p <0.001, **** p <0.0001.Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro + norma eraro de la mezumo, la malhela fazo (18: 00-06: 00 h) estas reprezentita per grizaj skatoloj. La punktoj sur la histogramoj reprezentas individuajn musojn. Mezaj valoroj estis kalkulitaj por la tuta eksperimenta periodo (0-96 horoj). n = 7.
Kiel homoj, musoj ofte kreas mikroambientojn por redukti varmoperdon al la medio. Por kvantigi la gravecon de ĉi tiu medio por EE, ni taksis EE ĉe 22, 25, 27.5 kaj 30 ° C, kun aŭ sen ledaj gardistoj kaj nestomaterialo. Je 22 ° C, la aldono de normaj haŭtoj reduktas EE ĉirkaŭ 4%. La posta aldono de nestanta materialo reduktis la EE je 3-4% (Fig. 5A, B). Neniuj signifaj ŝanĝoj en RER, konsumado de manĝaĵoj, konsumado de akvo aŭ aktivecoj estis observitaj kun la aldono de domoj aŭ haŭtoj + litoj (Figuro 5i -P). La aldono de haŭta kaj nestanta materialo ankaŭ signife reduktis EE je 25 kaj 30 ° C, sed la respondoj estis kvante pli malgrandaj. Je 27,5 ° C neniu diferenco estis observita. Notinde, en ĉi tiuj eksperimentoj, EE malpliiĝis kun kreskanta temperaturo, en ĉi tiu kazo ĉirkaŭ 57% malpli ol EE je 30 ° C kompare kun 22 ° C (Fig. 5C - H). La sama analizo estis farita nur por la luma fazo, kie la EE estis pli proksima al la baza metabola indico, ĉar en ĉi tiu kazo la musoj plejparte ripozis en la haŭto, rezultigante kompareblajn efikojn ĉe malsamaj temperaturoj (Suplementa Fig. 2a -H) .
Datumoj por musoj el ŝirmejo kaj nestanta materialo (malhelbluaj), hejmo sed neniu nestomaterialo (helblua), kaj hejma kaj nestomaterialo (oranĝa). Energia konsumo (ee, kcal/h) por ĉambroj A, C, E kaj G ĉe 22, 25, 27.5 kaj 30 ° C, B, D, F kaj H signifas EE (KCAL/H). IP -datumoj por musoj gastigitaj je 22 ° C: I spira rapideco (RER, VCO2/VO2), J meznombro RER (VCO2/VO2), K akumula manĝaĵa konsumado (G), L averaĝa konsumado de manĝaĵoj (G/24 h), M Tuta konsumado de akvo (ml), n averaĝa akva konsumado de AUC (ml/24h), o totala aktiveco (M), P meza aktiveco -nivelo (M/24H). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro + norma eraro de la mezumo, la malhela fazo (18: 00-06: 00 h) estas reprezentita per grizaj skatoloj. La punktoj sur la histogramoj reprezentas individuajn musojn. La statistika signifo de ripetaj mezuroj estis testita de Oneway-Anova sekvita de la multobla kompara testo de Tukey. *P <0.05, ** p <0.01. *P <0.05, ** p <0.01. *Р <0,05, ** р <0,01. *P <0.05, ** p <0.01. *P <0.05 ， ** P <0.01。 *P <0.05 ， ** P <0.01。 *Р <0,05, ** р <0,01. *P <0.05, ** p <0.01.Averaĝaj valoroj estis kalkulitaj por la tuta eksperimenta periodo (0-72 horoj). n = 7.
En normalaj pezaj musoj (2-3 horoj da fastado), kreskado ĉe malsamaj temperaturoj ne rezultigis signifajn diferencojn en plasmaj koncentriĝoj de TG, 3-HB, kolesterolo, ALT kaj AST, sed HDL kiel funkcio de temperaturo. Figuro 6a-e). Fastaj plasmaj koncentriĝoj de leptino, insulino, C-peptido kaj glucagono ankaŭ ne diferencis inter grupoj (Figuroj 6G-J). En la tago de la testo de glukoza toleremo (post 31 tagoj ĉe malsamaj temperaturoj), la basa sanga glukoza nivelo (5-6 horoj da fastado) estis proksimume 6,5 mm, sen diferenco inter la grupoj. Administrado de buŝa glukozo pliigis koncentriĝojn de sango -glukozo signife en ĉiuj grupoj, sed ambaŭ pinta koncentriĝo kaj pliiga areo sub la kurboj (IAUCoj) (15-120 min) estis pli malaltaj en la grupo de musoj loĝigitaj je 30 ° C (individuaj tempopunktoj: P <0.05 - P <0.0001, Fig. 6K, L) kompare kun la musoj loĝigitaj ĉe 22, 25 kaj 27.5 ° C (kiuj ne diferencis inter si). Administrado de buŝa glukozo pliigis koncentriĝojn de sango -glukozo signife en ĉiuj grupoj, sed ambaŭ pinta koncentriĝo kaj pliiga areo sub la kurboj (IAUCoj) (15-120 min) estis pli malaltaj en la grupo de musoj loĝigitaj je 30 ° C (individuaj tempopunktoj: P <0,05 - P <0,0001, Fig. 6K, L) kompare kun la musoj loĝigitaj ĉe 22, 25 kaj 27,5 ° C (kiuj ne diferencis unu inter si). Пероральное введение глюкозы значительно повышало концентрацию г г к, к, к к, к к, к к, к к, к к, к к, к к, к к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, к, ка ка. концентрация, так и площадь приращения под кривыы (Iauc) (15–120 м 30 °ыш, сейыш, сейыш, сейыш, сейыш, сейыш, сейыш, сейыш, се сейыш, се сейыш, сейи, сейи, сейи, се сейи, се се се се се се се сыш. (отдельные временные точки: p <0,05 - p <0,0001, рис. 6k, l) по сравнению ышыш, 25, к к (кwe к к (25 кwe к к (к к (к 25 к к (к к (к 25, 25 к (к к к (к 25, 25 к (к, к (к, 25 к (кwe кwe к20, 25, 25 кwe (к. различались между собой). Parola administrado de glukozo signife pliigis koncentriĝojn de glukozo en ĉiuj grupoj, sed ambaŭ pinta koncentriĝo kaj pliiga areo sub la kurboj (IAUC) (15-120 min) estis pli malaltaj en la grupo de musoj de 30 ° C (apartaj tempopunktoj: P <0.05– P <0,0001, Fig. 6k, L) kompare kun musoj konservitaj je 22, 25 kaj 27,5 ° C (kiuj ne diferencis unu de la alia).口服葡萄糖的给药显着增加了所有组的血糖浓度 ， 但在 30 ° C 饲养的小鼠组中 ， 峰值浓度和曲线下增加面积 (IAUC) (15-120 分钟) 均较低 （各个时间点： P <0.05 - P <0.0001 ， 图 6k ， L） 与饲养在 22、25 和 27.5 ° C 的小鼠 （彼此之间没有差异） 相比。口服 葡萄糖 的 给 药 显着 了 所有组 的 血糖 浓度 但 在 在 在 30 ° C 饲养 小鼠组 中 ， 浓度 和 曲线 下 增加 面积 面积 (IAUC) (15-120 分钟) 均 较 低 各 面积 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点 点点 ： p <0.05 - p < 0,0001 ， 图 6k ， L） 与饲养在 22、25 和 27,5 ° C 的小鼠 （彼此之间没有差异） 相比。Parola administrado de glukozo signife pliigis sangajn glukozajn koncentriĝojn en ĉiuj grupoj, sed ambaŭ pinta koncentriĝo kaj areo sub la kurbo (IAUC) (15-120 min) estis pli malaltaj en la 30 ° C-nutritaj musoj (ĉiuj tempopunktoj).: P <0,05 - p <0,0001, рис. : P <0,05 - p <0,0001, fig.6L, L) kompare kun musoj konservitaj je 22, 25 kaj 27.5 ° C (neniu diferenco unu de la alia).
Plasmaj koncentriĝoj de TG, 3-HB, kolesterolo, HDL, ALT, AST, FFA, glicerolo, leptino, insulino, C-peptido kaj glucagono estas montritaj en plenkreskaj viraj DIO (Al) musoj post 33 tagoj de nutrado ĉe la indikita temperaturo . Musoj ne estis nutritaj 2-3 horojn antaŭ specimeno de sango. La escepto estis buŝa glukoza tolerema testo, kiu estis farita du tagojn antaŭ la fino de la studo pri musoj fastitaj dum 5-6 horoj kaj konservita ĉe la taŭga temperaturo dum 31 tagoj. Musoj estis defiitaj kun 2 g/kg korpa pezo. La areo sub la kurbaj datumoj (L) estas esprimita kiel pliigaj datumoj (IAUC). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. La punktoj reprezentas individuajn specimenojn. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7. *P <0,05, ** p <0,01, ** p <0,001, **** p <0,0001, n = 7. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7. *P <0,05 ， ** p <0,01 ， ** p <0,001 ， **** p <0,0001 ， n = 7。 *P <0,05 ， ** p <0,01 ， ** p <0,001 ， **** p <0,0001 ， n = 7。 *P <0,05, ** p <0,01, ** p <0,001, **** p <0,0001, n = 7. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7.
En Dio-musoj (ankaŭ fastitaj dum 2-3 horoj), plasma kolesterolo, HDL, ALT, AST kaj FFA-koncentriĝoj ne diferencis inter grupoj. Ambaŭ TG kaj glicerolo estis signife levitaj en la grupo 30 ° C kompare kun la grupo 22 ° C (Figuroj 7A -H). Kontraŭe, 3-GB estis ĉirkaŭ 25% pli malalta je 30 ° C kompare kun 22 ° C (Figuro 7B). Tiel, kvankam musoj konservitaj je 22 ° C havis entute pozitivan energian ekvilibron, kiel sugestite per pezo-kresko, diferencoj en plasmaj koncentriĝoj de TG, glicerolo kaj 3-HB sugestas, ke musoj je 22 ° C kiam specimenado estis malpli ol 22 ° C. ° C. Musoj levitaj je 30 ° C estis en relative pli energie negativa stato. Konsentite kun ĉi tio, hepataj koncentriĝoj de ĉerpa glicerolo kaj TG, sed ne glicogeno kaj kolesterolo, estis pli altaj en la grupo 30 ° C (Suplementa Fig. 3A-D). Por esplori, ĉu la temperatur-dependaj diferencoj en lipolizo (laŭ mezuro de plasmo TG kaj glicerolo) estas la rezulto de internaj ŝanĝoj en epididimala aŭ inguina graso, ni ĉerpis adiposan histon el ĉi tiuj butikoj ĉe la fino de la studo kaj kvantigis liberan grasan acidan acidon eks- Vivo. kaj liberigo de glicerolo. En ĉiuj eksperimentaj grupoj, adipaj histaj specimenoj de epididimaj kaj inguinaj deponejoj montris almenaŭ duoblan pliiĝon de glicerolo kaj FFA-produktado en respondo al izoproterenol-stimulado (Suplementa Fig. 4A-D). Tamen, neniu efiko de ŝelo-temperaturo sur basa aŭ izoproterenol-stimulita lipolizo estis trovita. Konsentite kun pli alta korpa pezo kaj grasa maso, plasmaj leptinaj niveloj estis signife pli altaj en la grupo 30 ° C ol en la grupo 22 ° C (Figuro 7I). Male, plasmaj niveloj de insulino kaj C-peptido ne diferencis inter temperaturgrupoj (Fig. 7k, K), sed plasma glucagono montris dependecon de temperaturo, sed ĉi-kaze preskaŭ 22 ° C en la kontraŭa grupo estis dufoje kompare ĝis 30 ° C. De. Grupo C (Fig. 7L). FGF21 ne diferencis inter malsamaj temperaturgrupoj (Fig. 7M). En la tago de OGTT, basa sanga glukozo estis proksimume 10 mm kaj ne diferencis inter musoj loĝigitaj ĉe malsamaj temperaturoj (Fig. 7N). Parola administrado de glukozo pliigis nivelojn de glukozo de sango kaj pintis en ĉiuj grupoj je koncentriĝo de ĉirkaŭ 18 mM 15 minutoj post la dozo. Ne estis signifaj diferencoj en IAUC (15-120 min) kaj koncentriĝoj ĉe malsamaj tempopunktoj post-dozo (15, 30, 60, 90 kaj 120 min) (Figuro 7n, O).
Plasma koncentriĝoj de TG, 3-HB, kolesterolo, HDL, ALT, AST, FFA, glicerolo, leptino, insulino, C-peptido, glucagono kaj FGF21 estis montritaj en plenkreskaj dio (AO) musoj post 33 tagoj de nutrado. specifita temperaturo. Musoj ne estis nutritaj 2-3 horojn antaŭ specimeno de sango. La buŝa glukoza tolerema testo estis escepto, ĉar ĝi estis farita je dozo de 2 g/kg korpa pezo du tagojn antaŭ la fino de la studo en musoj, kiuj estis fastitaj dum 5-6 horoj kaj konservitaj ĉe la taŭga temperaturo dum 31 tagoj. La areo sub la kurbaj datumoj (O) estas montrita kiel pliigaj datumoj (IAUC). Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. La punktoj reprezentas individuajn specimenojn. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7. *P <0,05, ** p <0,01, ** p <0,001, **** p <0,0001, n = 7. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7. *P <0,05 ， ** p <0,01 ， ** p <0,001 ， **** p <0,0001 ， n = 7。 *P <0,05 ， ** p <0,01 ， ** p <0,001 ， **** p <0,0001 ， n = 7。 *P <0,05, ** p <0,01, ** p <0,001, **** p <0,0001, n = 7. *P <0.05, ** p <0.01, ** p <0.001, **** p <0.0001, n = 7.
La transdonebleco de ronĝaj datumoj al homoj estas kompleksa afero, kiu ludas centran rolon en interpretado de la graveco de observaĵoj en la kunteksto de fiziologia kaj farmakologia esplorado. Por ekonomiaj kialoj kaj por faciligi esploradon, musoj ofte konserviĝas ĉe ĉambra temperaturo sub sia termoneŭra zono, rezultigante la aktivigon de diversaj kompensaj fiziologiaj sistemoj, kiuj pliigas la metabolan indicon kaj eble malhelpas tradukeblecon9. Tiel, ekspozicio de musoj al malvarmo povas igi musojn imunaj al dieto-induktita obezeco kaj eble malhelpos hiperglicemon en streptozotocin-traktitaj ratoj pro pliigita ne-insulina dependa glukoza transporto. Tamen, ne klaras ĝis kia grado plilongigita ekspozicio al diversaj koncernaj temperaturoj (de ĉambro ĝis termoneŭtrala) influas la malsamajn energiajn homeostazojn de normalaj pezaj musoj (sur manĝaĵoj) kaj Dio -musoj (sur HFD) kaj metabolaj parametroj, same kiel la amplekso al kiu ili povis ekvilibrigi kreskon de EE kun pliigo de manĝaĵa konsumado. La studo prezentita en ĉi tiu artikolo celas alporti iom da klareco al ĉi tiu temo.
Ni montras, ke en normala pezo plenkreskaj musoj kaj viraj Dio -musoj, EE estas inverse rilata al ĉambra temperaturo inter 22 kaj 30 ° C. Tiel, EE je 22 ° C estis ĉirkaŭ 30% pli alta ol 30 ° C. Ambaŭ musaj modeloj. Tamen grava diferenco inter normalaj pezaj musoj kaj Dio -musoj estas, ke dum normalaj pezaj musoj kongruis kun EE ĉe pli malaltaj temperaturoj per ĝustigo de manĝaĵa konsumado laŭe, manĝaĵa konsumado de DIO -musoj variis je malsamaj niveloj. La studaj temperaturoj estis similaj. Post unu monato, Dio -musoj konservitaj je 30 ° C akiris pli da korpa pezo kaj grasa maso ol musoj konservitaj je 22 ° C, dum normalaj homoj konservitaj ĉe la sama temperaturo kaj dum la sama tempodaŭro ne kondukis al febro. dependa diferenco en korpa pezo. pezaj musoj. Kompare kun temperaturoj proksime de termoneŭtrala aŭ ĉe ĉambra temperaturo, kresko ĉe ĉambra temperaturo rezultigis DIO aŭ normalan pezan muson sur alta grasa dieto sed ne sur normala peza musa dieto por gajni relative malpli da pezo. korpo. Subtenata de aliaj studoj17,18,19,20,21 sed ne de All22,23.
La kapablo krei mikroambienton por redukti varmoperdon estas hipotezita por ŝanĝi termikan neŭtralecon maldekstren8, 12. En nia studo, ambaŭ aldono de nestomaterialo kaj kaŝado reduktis EE sed ne rezultigis termikan neŭtralecon ĝis 28 ° C. Tiel, niaj datumoj ne subtenas, ke la malalta punkto de termoneŭtraleco en unu-genuaj plenkreskaj musoj, kun aŭ sen medie riĉigitaj domoj, devas esti 26-28 ° C kiel montrite8,12, sed ĝi subtenas aliajn studojn montrantajn termoneŭtralecon. Temperaturoj de 30 ° C en malaltaj punktaj musoj7, 10, 24. Por komplikigi aferojn, la termoneŭtrala punkto en musoj montriĝis ne statika dum la tago, ĉar ĝi estas pli malalta dum la ripoza (malpeza) fazo, eble pro pli malalta kalorio Produktado rezulte de aktiveco kaj dieto-induktita termogenezo. Tiel, en la luma fazo, la malsupra punkto de termika neŭtraleco rezultas esti ~ 29 ° с, kaj en la malhela fazo, ~ 33 ° с25.
Finfine, la rilato inter ĉirkaŭa temperaturo kaj totala energikonsumo estas determinita per varmega disipado. En ĉi tiu kunteksto, la rilatumo de surfacareo al volumo estas grava determinanto de termika sentiveco, tuŝante ambaŭ varmegan disipadon (surfacan areon) kaj varmegan generacion (volumo). Aldone al surfacareo, varmotransigo ankaŭ estas determinita per izolado (rapideco de varmotransigo). Ĉe homoj, grasa maso povas redukti varmoperdon kreante izolan baron ĉirkaŭ la korpa ŝelo, kaj oni sugestis, ke grasa maso gravas ankaŭ por termika izolado en musoj, malaltigante la termoneŭtralan punkton kaj reduktante temperatur -sentivecon sub la termika neŭtrala punkto ( kurba deklivo). ĉirkaŭa temperaturo kompare kun EE) 12. Nia studo ne estis desegnita por rekte taksi ĉi tiun putan rilaton ĉar datumoj de korpa konsisto estis kolektitaj 9 tagojn antaŭ ol datumoj pri energiaj elspezoj estis kolektitaj kaj ĉar grasa maso ne estis stabila dum la studo. Tamen, ĉar normala pezo kaj DIO-musoj havas 30% pli malaltan EE je 30 ° C ol je 22 ° C malgraŭ almenaŭ 5-obla diferenco en grasa maso, niaj datumoj ne subtenas, ke obezeco devas provizi bazan izoladon. faktoro, almenaŭ ne en la enketita temperaturintervalo. Ĉi tio kongruas kun aliaj studoj pli bone desegnitaj por esplori ĉi4,24. En ĉi tiuj studoj, la izolanta efiko de obezeco estis malgranda, sed pelto estis trovita havigi 30-50% de totala termika izolado4,24. Tamen, ĉe mortaj musoj, termika konduktiveco pliiĝis ĉirkaŭ 450% tuj post la morto, sugestante, ke la izolanta efiko de la pelto estas necesa por fiziologiaj mekanismoj, inkluzive de vasokonstrikcio, funkcii. Krom la diferencoj de specioj en pelto inter musoj kaj homoj, la malbona izolanta efiko de obezeco en musoj ankaŭ povas esti influita de la jenaj konsideroj: la izolanta faktoro de homa grasa maso estas ĉefe mediaciita de subkutana grasa maso (dikeco) 26,27. Tipe en ronĝuloj malpli ol 20% de la tuta besta graso28. Krome, totala grasa maso eble eĉ ne estas suboptima mezuro de la termika izolado de individuo, ĉar oni argumentis, ke plibonigita termika izolado kompensas la neeviteblan kreskon de surfaco (kaj tial pliigita varmoperdo) dum grasa maso pliiĝas. .
En normalaj pezaj musoj, rapidaj plasmaj koncentriĝoj de TG, 3-HB, kolesterolo, HDL, ALT kaj AST ne ŝanĝiĝis ĉe diversaj temperaturoj dum preskaŭ 5 semajnoj, probable ĉar la musoj estis en la sama stato de energia ekvilibro. estis samaj en pezo kaj korpa konsisto kiel ĉe la fino de la studo. Konsentite kun la simileco en grasa maso, ankaŭ ne estis diferencoj en plasmaj leptinaj niveloj, nek en fastanta insulino, C-peptido kaj glucagono. Pli da signaloj estis trovitaj en Dio -musoj. Kvankam musoj je 22 ° C ankaŭ ne havis ĝeneralan negativan energian ekvilibron en ĉi tiu stato (ĉar ili gajnis pezon), ĉe la fino de la studo ili estis relative pli energiaj deficitaj kompare kun musoj levitaj je 30 ° C, en kondiĉoj kiel ekzemple altaj ketonoj. Produktado laŭ la korpo (3-GB) kaj malpliigo de la koncentriĝo de glicerolo kaj TG en plasmo. Tamen, temperatur-dependaj diferencoj en lipolizo ne ŝajnas esti la rezulto de intrinsekaj ŝanĝoj en epididimala aŭ inguinal graso, kiel ŝanĝoj en la esprimo de adipohormon-responda lipase, ĉar FFA kaj glicerolo liberigitaj de graso ĉerpitaj el ĉi tiuj deponejoj estas inter temperaturo, ĉar grupoj similas unu al la alia. Kvankam ni ne esploris simpatian tonon en la nuna studo, aliaj trovis, ke ĝi (surbaze de korfrekvenco kaj meznombro de arteria premo) lineare rilatas al ĉirkaŭa temperaturo en musoj kaj estas proksimume pli malalta je 30 ° C ol je 22 ° C 20% C Tiel, temperatur-dependaj diferencoj en simpatia tono povas ludi rolon en lipolizo en nia studo, sed ĉar pliigo de simpatia tono stimulas anstataŭ inhibi lipolizon, aliaj mekanismoj povas kontraŭstari Ĉi tiu malpliiĝo de kulturitaj musoj. Ebla rolo en la rompo de korpa graso. Ĉambra temperaturo. Furthermore, part of the stimulatory effect of sympathetic tone on lipolysis is indirectly mediated by strong inhibition of insulin secretion, highlighting the effect of insulin interrupting supplementation on lipolysis30, but in our study, fasting plasma insulin and C-peptide sympathetic tone at different temperatures were ne sufiĉas por ŝanĝi lipolizon. Anstataŭe, ni trovis, ke diferencoj en energia stato estis plej verŝajne la ĉefa kontribuanto al ĉi tiuj diferencoj en Dio -musoj. La subaj kialoj, kiuj kondukas al pli bona regulado de manĝaĵa konsumado kun EE en normalaj pezaj musoj, postulas plian studadon. Ĝenerale, tamen, manĝaĵa konsumado estas regata de homeostatikaj kaj hedonaj kvereloj31,32,33. Kvankam estas debato pri kiu el la du signaloj estas kvante pli grava, 31,32,33 estas sciate, ke longtempa konsumado de altaj grasaj manĝaĵoj kondukas al pli plezur-bazita manĝanta konduto, kiu estas iel senrilata al homeostasis. . - Reguligita manĝaĵa konsumado34,35,36. Tial, la pliigita hedona nutra konduto de DIO -musoj traktitaj kun 45% HFD eble estas unu el la kialoj, kial ĉi tiuj musoj ne ekvilibrigis manĝaĵon kun EE. Interese, diferencoj en apetito kaj sango-glukozo-reguligantaj hormonoj ankaŭ estis observitaj en la dio-kontrolitaj temperatur-musoj, sed ne en normalaj pezaj musoj. En Dio -musoj, plasmaj leptinaj niveloj pliiĝis kun temperaturo kaj glucagonaj niveloj malpliiĝis kun temperaturo. La amplekso en kiu temperaturo povas rekte influi ĉi tiujn diferencojn meritas plian studadon, sed en la kazo de leptino, la relativa negativa energia ekvilibro kaj tiel malpliigas grasan mason en musoj je 22 ° C certe ludis gravan rolon, ĉar grasa maso kaj plasma leptino estas tre korelaciita37. Tamen, la interpreto de la glucagona signalo estas pli enigma. Kiel ĉe insulino, sekrecio de glucagono estis forte inhibita de pliigo de simpatia tono, sed la plej alta simpatia tono estis antaŭvidita esti en la grupo 22 ° C, kiu havis la plej altajn plasmajn glucagajn koncentriĝojn. Insulino estas alia forta reguligilo de plasma glucagono, kaj insulina rezisto kaj diabeto de tipo 2 estas forte asociitaj kun fastado kaj postprandia hiperglucagonemio 38,39. Tamen, la Dio -musoj en nia studo ankaŭ estis insulinaj nesentemaj, do ĉi tio ankaŭ ne povus esti la ĉefa faktoro en la kresko de glucagona signalado en la grupo 22 ° C. Hepata grasa enhavo ankaŭ estas pozitive asociita kun pliigo de plasma glucagona koncentriĝo, kies mekanismoj, siavice, povas inkluzivi hepatan glucagon-reziston, malpliigi urean produktadon, pliigitan cirkulantan aminoacidan koncentriĝon kaj pliigi aminoacidan glucagon-sekrecion 40,41, 42. Tamen, ĉar ĉerpaj koncentriĝoj de glicerolo kaj TG ne diferencis inter temperaturgrupoj en nia studo, ĉi tio ankaŭ ne povus esti ebla faktoro en la kresko de plasmaj koncentriĝoj en la grupo 22 ° C. Triiodotironino (T3) ludas kritikan rolon en totala metabola indico kaj iniciato de metabola defendo kontraŭ hipotermio43,44. Tiel, plasma T3 -koncentriĝo, eble kontrolita per centre mediaciitaj mekanismoj, 45,46 pliiĝoj en musoj kaj homoj sub malpli ol termonutralaj kondiĉoj47, kvankam la kresko de homoj estas pli malgranda, kio estas pli predikita al musoj. Ĉi tio konformas al varmoperdo al la medio. Ni ne mezuris plasmajn T3 -koncentriĝojn en la nuna studo, sed koncentriĝoj eble estis pli malaltaj en la grupo 30 ° C, kio eble klarigos la efikon de ĉi tiu grupo sur plasmaj glucagonaj niveloj, ĉar ni (ĝisdatigita Figuro 5A) kaj aliaj montris tion T3 pliigas plasman glucagon laŭ dozo-dependa maniero. Oni raportis, ke tiroidaj hormonoj induktas esprimon FGF21 en la hepato. Kiel glucagono, plasmo FGF21 -koncentriĝoj ankaŭ pliiĝis kun plasmaj T3 -koncentriĝoj (Suplementa Fig. 5B kaj Ref. 48), sed kompare kun glucagono, FGF21 -plasmaj koncentriĝoj en nia studo ne estis tuŝitaj de temperaturo. La subaj kialoj de ĉi tiu diskreteco postulas plian studadon, sed T3-movita FGF21-indukto devas okazi ĉe pli altaj niveloj de T3-ekspozicio kompare kun la observita T3-movita glucagona respondo (Suplementa Fig. 5B).
HFD estis montrita forte asociita kun difektita glukoza toleremo kaj insulina rezisto (markiloj) en musoj levitaj je 22 ° C. Tamen, HFD ne estis asociita kun nek difektita glukoza toleremo aŭ insulina rezisto kiam kreskita en termonutrala medio (difinita ĉi tie kiel 28 ° C) 19. En nia studo, ĉi tiu rilato ne estis replikita en DIO -musoj, sed normalaj pezaj musoj konservitaj je 30 ° C signife plibonigis glukozan toleremon. La kialo de ĉi tiu diferenco postulas plian studadon, sed povas esti influita de la fakto, ke la DIO-musoj en nia studo estis insulin-imunaj, kun fastaj plasmaj C-peptidaj koncentriĝoj kaj insulinaj koncentriĝoj 12-20 fojojn pli altaj ol normalaj pezaj musoj. kaj en la sango sur malplena stomako. Glukozaj koncentriĝoj de ĉirkaŭ 10 mM (ĉirkaŭ 6 mM ĉe normala korpa pezo), kio ŝajnas lasi malgrandan fenestron por eblaj utilaj efikoj de ekspozicio al termoneŭraj kondiĉoj por plibonigi glukozon. Ebla konfuza faktoro estas, ke pro praktikaj kialoj, OGTT efektiviĝas ĉe ĉambra temperaturo. Tiel, musoj gastigitaj ĉe pli altaj temperaturoj spertis mildan malvarman ŝokon, kio povas influi glukozon -absorbadon/malplenigon. Tamen, surbaze de similaj fastaj sangaj glukozaj koncentriĝoj en malsamaj temperaturgrupoj, ŝanĝoj en ĉirkaŭa temperaturo eble ne influis signife la rezultojn.
Kiel menciite antaŭe, lastatempe oni emfazis, ke pliigi la ĉambran temperaturon povas mildigi iujn reagojn al malvarma streso, kiu eble pridubas la transdoneblecon de musaj datumoj al homoj. Tamen ne klaras, kio estas la optimuma temperaturo por teni musojn imiti homan fiziologion. La respondo al ĉi tiu demando ankaŭ povas esti influita de la kampo de studo kaj la finpunkto studata. Ekzemplo de tio estas la efiko de dieto sur hepata grasa amasiĝo, glukoza toleremo kaj insulina rezisto19. Koncerne energian elspezon, iuj esploristoj opinias, ke termonutraleco estas la optimuma temperaturo por bredado, ĉar homoj postulas malmultan ekstran energion por konservi sian kernan korpan temperaturon, kaj ili difinas ununuran rondiron por plenkreskaj musoj kiel 30 ° C7,10. Aliaj esploristoj opinias, ke temperaturo komparebla al tio, ke homoj tipe spertas kun plenkreskaj musoj sur unu genuo estas 23-25 ° C, ĉar ili trovis termoneŭtralecon 26-28 ° C kaj surbaze de homoj malpli ol 3 ° C. Ilia pli malalta kritika temperaturo, difinita ĉi tie kiel 23 ° C, estas iomete 8.12. Nia studo konformas al pluraj aliaj studoj, kiuj deklaras, ke termika neŭtraleco ne atingas ĉe 26-28 ° C4, 7, 10, 11, 24, 25, indikante, ke 23-25 ° C estas tro malalta. Alia grava faktoro por konsideri pri ĉambra temperaturo kaj termoneŭtraleco en musoj estas unuopa aŭ grupa loĝejo. Kiam musoj estis loĝigitaj en grupoj prefere ol individue, kiel en nia studo, temperatur -sentiveco reduktiĝis, eble pro amasiĝo de la bestoj. Tamen, ĉambra temperaturo ankoraŭ estis sub la LTL de 25 kiam estis uzataj tri grupoj. Eble la plej grava interspaca diferenco tiurilate estas la kvanta signifo de BAT -agado kiel defendo kontraŭ hipotermio. Tiel, dum musoj plejparte kompensis sian pli altan kalorian perdon per pliigo de BAT -agado, kiu estas pli ol 60% EE je 5 ° C sole, 51,52 la kontribuo de homa vesperto al EE estis signife pli alta, multe pli malgranda. Tial redukti BAT -agadon eble estas grava maniero por pliigi homan tradukadon. La regulado de BAT -agado estas kompleksa sed ofte estas mediaciita per la kombinitaj efikoj de adrenergia stimulo, tiroides -hormonoj kaj UCP114,54,55,56,57 esprimo. Niaj datumoj indikas, ke la temperaturo devas esti levita super 27,5 ° C kompare kun musoj je 22 ° C por detekti diferencojn en la esprimo de BAT -genoj respondecaj pri funkcio/aktivigo. Tamen, la diferencoj trovitaj inter grupoj je 30 kaj 22 ° C ne ĉiam indikis kreskon de BAT-agado en la grupo 22 ° C ĉar UCP1, ADRB2 kaj VEGF-A estis malreguligitaj en la grupo 22 ° C. La radika kaŭzo de ĉi tiuj neatenditaj rezultoj restas por determini. Unu ebleco estas, ke ilia pliigita esprimo eble ne reflektas signalon de levita ĉambra temperaturo, sed prefere akra efiko movi ilin de 30 ° C al 22 ° C en la tago de forigo (la musoj spertis ĉi tion 5-10 minutojn antaŭ ekflugo) . ).
Ĝenerala limigo de nia studo estas, ke ni nur studis virajn musojn. Aliaj esploroj sugestas, ke sekso povas esti grava konsidero en niaj primaraj indikoj, ĉar unu-genuaj inaj musoj estas pli sentemaj de temperaturo pro pli alta termika konduktiveco kaj konservado de pli strikte kontrolitaj kernaj temperaturoj. Krome, inaj musoj (sur HFD) montris pli grandan asocion de energia konsumado kun EE je 30 ° C kompare kun viraj musoj, kiuj konsumis pli da musoj de la sama sekso (20 ° C en ĉi tiu kazo) 20. Tiel, ĉe inaj musoj, la efiko subthermonetra enhavo estas pli alta, sed havas la saman padronon kiel ĉe viraj musoj. En nia studo, ni koncentriĝis pri unu-genuaj viraj musoj, ĉar ĉi tiuj estas la kondiĉoj en kiuj estas farataj plej multaj el la metabolaj studoj ekzamenantaj EE. Alia limigo de nia studo estis, ke la musoj estis sur la sama dieto dum la studo, kio malhelpis studi la gravecon de ĉambra temperaturo por metabola fleksebleco (laŭ mezuro de RER -ŝanĝoj por dietaj ŝanĝoj en diversaj makronutrientaj komponaĵoj). ĉe inaj kaj viraj musoj konservitaj je 20 ° C kompare kun respondaj musoj konservitaj je 30 ° C.
Konklude, nia studo montras, ke kiel en aliaj studoj, rondiroj 1 normalaj pezaj musoj estas termoneŭtralaj super la antaŭdiritaj 27,5 ° C. Krome, nia studo montras, ke obezeco ne estas grava izolanta faktoro en musoj kun normala pezo aŭ DIO, rezultigante similan temperaturon: EE -proporcioj en DIO kaj normala pezo -musoj. Dum la konsumado de normalaj pezaj musoj estis konforma al la EE kaj tiel konservis stabilan korpan pezon super la tuta temperaturintervalo, la manĝaĵo de DIO -musoj estis la sama ĉe malsamaj temperaturoj, rezultigante pli altan rilatumon de musoj je 30 ° C . je 22 ° C gajnis pli da korpa pezo. Entute, sistemaj studoj ekzamenantaj la eblan gravecon vivi sub termoneŭtralaj temperaturoj estas garantiitaj pro la ofte observataj malriĉaj tolereblecoj inter muso kaj homaj studoj. Ekzemple, en studoj pri obezeco, parta klarigo por la ĝenerale pli malriĉa tradukebleco povas esti pro la fakto, ke studoj pri perdo de pezo de muroj estas kutime faritaj sur modere malvarmaj streĉitaj bestoj konservitaj ĉe ĉambra temperaturo pro ilia pliigita EE. Troigita pezoperdo kompare kun la atendata korpa pezo de homo, precipe se la mekanismo de agado dependas de kreskanta EE pliigante la agadon de BAP, kiu estas pli aktiva kaj aktivigita ĉe ĉambra temperaturo ol je 30 ° C.
Konforme al la Dana Besto-Eksperimenta Juro (1987) kaj la Naciaj Institutoj de Sano (Publikigado n-ro 85-23) kaj la Eŭropa Konvencio por Protekto de Vertebruloj uzataj por eksperimentaj kaj aliaj sciencaj celoj (Konsilio de Eŭropo n-ro 123, Strasbourg , 1985).
Dudek semajnaj viraj C57BL/6J-musoj estis akiritaj de Janvier Saint Berthevin Cedex, Francio, kaj ricevis ad libitum norman Chow (altromin 1324) kaj akvon (~ 22 ° C) post 12:12 hora lumo: malhela ciklo. ĉambra temperaturo. Viraj Dio -musoj (20 semajnoj) estis akiritaj de la sama provizanto kaj ricevis aliron al libitum al 45% alta grasa dieto (Kat. Ne. D12451, Esplora Dieto Inc., NJ, Usono) kaj akvo en reproduktaj kondiĉoj. Musoj estis adaptitaj al la medio semajnon antaŭ la komenco de la studo. Du tagojn antaŭ transdono al la nerekta kalorimet -sistemo, musoj estis pesitaj, submetitaj al MRI -skanado (Echomritm, TX, Usono) kaj dividitaj en kvar grupojn respondajn al korpa pezo, graso kaj normala korpa pezo.
Grafika diagramo de la studa dezajno estas montrita en Figuro 8. Musoj estis translokigitaj al fermita kaj temperatur-kontrolita nerekta kalorimetrio-sistemo ĉe Sable Systems Internationals (Nevado, Usono), kiu inkluzivis manĝaĵojn kaj akvokvalitajn monitorojn kaj Promethion BZ1-kadron, kiu registris aktivecaj niveloj per mezurado de trabo. XYZ. Musoj (n = 8) estis loĝigitaj individue ĉe 22, 25, 27.5 aŭ 30 ° C uzante litojn sed neniu ŝirmejo kaj nestanta materialo sur 12: 12-hora lumo: malhela ciklo (lumo: 06: 00– 18:00) . 2500ml/min. Musoj estis aklimatigitaj dum 7 tagoj antaŭ registriĝo. Registradoj estis kolektitaj kvar tagojn sinsekve. Poste, musoj estis konservitaj ĉe la respektivaj temperaturoj ĉe 25, 27.5, kaj 30 ° C dum pliaj 12 tagoj, post kio la ĉelaj koncentriĝoj estis aldonitaj kiel priskribite sube. Dume, grupoj de musoj konservitaj je 22 ° C estis konservitaj ĉe ĉi tiu temperaturo dum du pliaj tagoj (por kolekti novajn bazajn datumojn), kaj tiam la temperaturo estis pliigita en paŝoj de 2 ° C ĉiun duan tagon komence de la luma fazo ( 06:00) Ĝis atingado de 30 ° C post tio, la temperaturo estis malaltigita al 22 ° C kaj datumoj estis kolektitaj dum aliaj du tagoj. Post du pliaj tagoj de registrado je 22 ° C, feloj estis aldonitaj al ĉiuj ĉeloj ĉe ĉiuj temperaturoj, kaj datumkolektado komenciĝis en la dua tago (tago 17) kaj dum tri tagoj. Post tio (tago 20), nestanta materialo (8-10 g) estis aldonita al ĉiuj ĉeloj komence de la luma ciklo (06:00) kaj datumoj estis kolektitaj dum aliaj tri tagoj. Tiel, ĉe la fino de la studo, musoj konservitaj je 22 ° C estis konservitaj ĉe ĉi tiu temperaturo dum 21/33 tagoj kaj je 22 ° C dum la lastaj 8 tagoj, dum musoj ĉe aliaj temperaturoj estis konservitaj ĉe ĉi tiu temperaturo dum 33 tagoj. /33 tagoj. Musoj estis nutritaj dum la studperiodo.
Normala pezo kaj Dio -musoj sekvis la samajn studajn procedojn. Je la tago -9, musoj estis pesitaj, MRI skanis, kaj dividitaj en grupojn kompareblajn en korpa pezo kaj korpa konsisto. En tago -7, musoj estis translokigitaj al fermita temperaturo kontrolita nerekta kalorimetria sistemo fabrikita de Sable Systems International (Nevado, Usono). Musoj estis loĝigitaj individue kun litoj sed sen nestado aŭ ŝirmejaj materialoj. La temperaturo estas agordita al 22, 25, 27.5 aŭ 30 ° C. Post unu semajno da aklimatigo (tagoj -7 ĝis 0, bestoj ne estis ĝenitaj), datumoj estis kolektitaj dum kvar sinsekvaj tagoj (tagoj 0-4, datumoj montritaj en Figoj 1, 2, 5). Poste, musoj konservitaj je 25, 27.5 kaj 30 ° C estis konservitaj en konstantaj kondiĉoj ĝis la 17a tago. Samtempe, la temperaturo en la grupo 22 ° C estis pliigita je intertempoj de 2 ° C ĉiun alian tagon alĝustigante la temperaturciklon (06:00 h) komence de malpeza ekspozicio (datumoj estas montritaj en Fig. 1) . En la tago 15, la temperaturo falis al 22 ° C kaj du tagoj da datumoj estis kolektitaj por provizi bazajn datumojn por postaj traktadoj. Feloj estis aldonitaj al ĉiuj musoj en la tago 17, kaj nestomaterialo estis aldonita en la tago 20 (Fig. 5). En la 23 -a tago, la musoj estis pesitaj kaj submetitaj al MRI -skanado, kaj tiam lasitaj solaj dum 24 horoj. En la tago 24, musoj estis fastitaj de la komenco de la fotoperiodo (06:00) kaj ricevis OGTT (2 g/kg) je 12:00 (6-7 horoj da fastado). Poste, la musoj estis redonitaj al siaj respektivaj Sable -kondiĉoj kaj eŭtanigitaj en la dua tago (tago 25).
Dio -musoj (n = 8) sekvis la saman protokolon kiel normalaj pezaj musoj (kiel priskribite supre kaj en Figuro 8). Musoj subtenis 45% HFD dum la energia elspeza eksperimento.
VO2 kaj VCO2, same kiel akva vaporo -premo, estis registritaj je frekvenco de 1 Hz kun ĉela tempo -konstanto de 2,5 min. Manĝaĵo kaj akvo -konsumado estis kolektitaj per kontinua registrado (1 Hz) de la pezo de la manĝaĵoj kaj akvaj paŝoj. La kvalita monitoro uzata raportis rezolucion de 0,002 g. Aktivecaj niveloj estis registritaj uzante 3D XYZ -trabo -monitoron, datumoj estis kolektitaj ĉe interna rezolucio de 240 Hz kaj raportis ĉiun sekundon por kvantigi totalan distancon veturitan (M) kun efika spaca rezolucio de 0,25 cm. La datumoj estis prilaboritaj per SABLE Systems Macro Interpreter v.2.41, kalkulante EE kaj RER kaj filtrante eksterojn (ekz. Falsaj manĝaj eventoj). La makro -interpretisto estas agordita por eligi datumojn por ĉiuj parametroj ĉiujn kvin minutojn.
Krom reguligi EE, ĉirkaŭa temperaturo ankaŭ povas reguligi aliajn aspektojn de metabolo, inkluzive de postprandia glukoza metabolo, reguligante la sekrecion de glukozo-metaboligantaj hormonoj. Por testi ĉi tiun hipotezon, ni finfine kompletigis korpan temperatur -studon provokante normalajn pezajn musojn per dio buŝa glukoza ŝarĝo (2 g/kg). Metodoj estas detale priskribitaj en aldonaj materialoj.
Je la fino de la studo (tago 25), musoj estis fastitaj dum 2-3 horoj (komencante de 06:00), anestezitaj per izoflurano, kaj tute bleditaj de retroorbital-venenpunkto. Kvantumado de plasmaj lipidoj kaj hormonoj kaj lipidoj en la hepato estas priskribita en suplementaj materialoj.
Esplori, ĉu ŝela temperaturo kaŭzas intrinsekajn ŝanĝojn en adiposa histo influanta lipolizon, inguinal kaj epididima adiposa histo estis elĉerpita rekte de musoj post la lasta etapo de sangado. Ŝtofoj estis prilaboritaj uzante la lastatempe evoluintan eksvivan lipolizan teston priskribitan en suplementaj metodoj.
Bruna adiposa histo (BAT) estis kolektita en la tago de la fino de la studo kaj prilaborita kiel priskribite en la suplementaj metodoj.
Datumoj estas prezentitaj kiel meznombro ± SEM. Grafikoj estis kreitaj en GraphPad Prism 9 (La Jolla, CA) kaj grafikaĵoj estis redaktitaj en Adobe Illustrator (Adobe Systems Incorporated, San Jose, CA). Statistika signifo estis taksita en GraphPad Prism kaj testita per parigita t-testo, ripetaj mezuroj unudirekta/duflanka ANOVA sekvita per la multobla komparo-testo de Tukey, aŭ neparenca unudirekta ANOVA sekvita de la multobla komparo-testo de Tukey laŭ bezono. La gaŭsa distribuo de la datumoj estis validigita per la D'Agostino-Pearson-Normala Testo antaŭ testado. La specimeno estas indikita en la responda sekcio de la sekcio "Rezultoj", same kiel en la legendo. Ripeto estas difinita kiel iu ajn mezurado sur la sama besto (in vivo aŭ sur histo -specimeno). Koncerne al reproduktebleco de datumoj, asocio inter energia elspezo kaj kazo -temperaturo estis montrita en kvar sendependaj studoj uzante malsamajn musojn kun simila studa dezajno.
Detalaj eksperimentaj protokoloj, materialoj kaj krudaj datumoj estas haveblaj laŭ akceptebla peto de plumba aŭtoro Rune E. Kuhre. Ĉi tiu studo ne generis novajn unikajn reaktivojn, transgenajn bestajn/ĉelajn liniojn aŭ sekvencajn datumojn.
Por pliaj informoj pri studa projektado, vidu la raporton pri natur -esploro abstrakta ligita al ĉi tiu artikolo.
Ĉiuj datumoj formas grafeon. 1-7 estis deponitaj en la deponejo de scienca datumbazo, alira numero: 1253.11.sciencedb.02284 aŭ https://doi.org/10.57760/sciencedb.02284. La datumoj montritaj en ESM povas esti senditaj al Rune e Kuhre post racia testado.
Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, Mo & Tang-Christensen, M. Laboratoriaj bestoj kiel surogataj modeloj de homa obezeco. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, Mo & Tang-Christensen, M. Laboratoriaj bestoj kiel surogataj modeloj de homa obezeco.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO. kaj Tang-Christensen M. Laboratoriaj bestoj kiel surogataj modeloj de homa obezeco. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, Mo & Tang-Christensen, M. 实验动物作为人类肥胖的替代模型。 Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, Mo & Tang-Christensen, M. Eksperimentaj bestoj kiel anstataŭa modelo por homoj.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO. kaj Tang-Christensen M. Laboratoriaj bestoj kiel surogataj modeloj de obezeco en homoj.Acta Farmakologio. Krimo 33, 173-181 (2012).
Gilpin, DA -kalkulo de la nova konstanta mie kaj eksperimenta determino de la bruliga grandeco. Burns 22, 607–611 (1996).
Gordon, SJ La musa termoregula sistemo: ĝiaj implicoj por la translokado de biomedicinaj datumoj al homoj. Fiziologio. Konduto. 179, 55-66 (2017).
Fischer, AW, CSIKASZ, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Neniu izolanta efiko de obezeco. Fischer, AW, CSIKASZ, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Neniu izolanta efiko de obezeco.Fischer AW, Chikash RI, von Essen G., Cannon B., kaj Nedergaard J. Neniu izola efiko de obezeco. Fischer, AW, CSIKASZ, RI, Von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. 肥胖没有绝缘作用。 Fischer, AW, CSIKASZ, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, CSIKASZ, RI, Von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. ожирение не имет изолирующего эфекта. Fischer, AW, CSIKASZ, RI, Von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Obezeco havas neniun izolan efikon.Jes. J. Fiziologio. endokrina. metabolo. 311, E202 - E213 (2016).
Lee, P. et al. Temperaturo-adaptita bruna adiposa histo modulas insulin-sentivecon. Diabeto 63, 3686–3698 (2014).
Nakhon, KJ et al. Pli malalta kritika temperaturo kaj malvarma induktita termogenezo estis inverse rilataj al korpa pezo kaj baza metabola indico en malgrasaj kaj sobrepesaj individuoj. J. Varme. Biologio. 69, 238–248 (2017).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Optimumaj loĝaj temperaturoj por musoj por imiti la termikan medion de homoj: eksperimenta studo. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Optimumaj loĝaj temperaturoj por musoj por imiti la termikan medion de homoj: eksperimenta studo.Fischer, AW, Cannon, B., kaj Nedergaard, J. Optimumaj domaj temperaturoj por musoj por imiti la homan termikan medion: eksperimenta studo. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. 小鼠模拟人类热环境的最佳住房温度 ： 一项实验研究。 Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.Fisher AW, Cannon B., kaj Nedergaard J. Optimuma loĝada temperaturo por musoj simulantaj homan termikan medion: eksperimenta studo.Moore. metabolo. 7, 161–170 (2018).
Keijer, J., Li, M. & Speakman, Jr Kio estas la plej bona loĝada temperaturo por traduki musajn eksperimentojn al homoj? Keijer, J., Li, M. & Speakman, Jr Kio estas la plej bona loĝada temperaturo por traduki musajn eksperimentojn al homoj?Keyer J, Lee M kaj Speakman Jr Kio estas la plej bona ĉambra temperaturo por translokigi musajn eksperimentojn al homoj? Keijer, J., Li, M. & Speakman, Jr 将小鼠实验转化为人类的最佳外壳温度是多少？ Keijer, J., Li, M. & Speakman, JrKeyer J, Lee M kaj Speakman Jr Kio estas la optimuma ŝela temperaturo por translokigi musajn eksperimentojn al homoj?Moore. metabolo. 25, 168–176 (2019).
Seeley, RJ & MacDougald, OA -musoj kiel eksperimentaj modeloj por homa fiziologio: Kiam pluraj gradoj en loĝejaj temperaturoj. Seeley, RJ & MacDougald, OA -musoj kiel eksperimentaj modeloj por homa fiziologio: Kiam pluraj gradoj en loĝejaj temperaturoj. Seeley, RJ & MacDougald, Oa ыши как экспериментальные модели для физиологи человека: кога нжkaj ккж knabo вж knabo вжич kien вж knabo виеское гundo вв knabo виkata вжи knabo виеское undo ввиескfono вжundo. значение. Seeley, RJ & MacDougald, OA -musoj kiel eksperimentaj modeloj por homa fiziologio: kiam kelkaj gradoj en loĝejo diferencas. Seeley, RJ & MacDougald, OA 小鼠作为人类生理学的实验模型 ： ： 当几度的住房温度很重要时。 Seeley, RJ & MacDougald, OA Мыши Seeley, RJ & MacDougald, Oa кок экспериментальная модель физиологи человека: когда нерпкк г Sed щиуeroj гии тиу Sed ти Sed щи Sed ти Sed щиу Sed тиу Sed т Sed т Sed. имеют значение. Seeley, RJ & MacDougald, OA -musoj kiel eksperimenta modelo de homa fiziologio: Kiam kelkaj gradoj da ĉambra temperaturo gravas.Nacia metabolo. 3, 443–445 (2021).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. La respondo al la demando "Kio estas la plej bona loĝada temperaturo por traduki musajn eksperimentojn al homoj?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. La respondo al la demando "Kio estas la plej bona loĝada temperaturo por traduki musajn eksperimentojn al homoj?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Respondu al la demando "Kio estas la plej bona ĉambra temperaturo por translokigi musajn eksperimentojn al homoj?" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. 问题的答案 "将小鼠实验转化为人类的最佳外壳温度是多少？" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.Fisher Aw, Cannon B., kaj Nedergaard J. respondas al la demando "Kio estas la optimuma ŝela temperaturo por translokigi musajn eksperimentojn al homoj?"Jes: Termoneŭtrala. Moore. metabolo. 26, 1-3 (2019).
Afiŝotempo: Okt-28-2022
